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          核酸提取試劑盒使用方法

          來源:www.portalcanaa.com         發布時間:2021-10-30
          核酸提取試劑盒,其特征在于,所述試劑盒內包括單獨配制的混合酶工作液、裂解吸附液、洗滌液、漂洗液和洗脫液,所述混合酶工作液包括蛋白酶K和溶菌酶,所述裂解吸附液包括Gu-Hcl、Tris-Hcl、EDTA、異丙醇、SDS、Triton-100、β-巰基乙醇和檸檬酸鈉,所述洗滌液包括Licl、Nacl、MOPS和乙醇,所述漂洗液為乙醇,所述洗脫液為EDTA和Tris-Hcl。
          2.根據權利要求1所述的核酸提取試劑盒,其特征在于,所述混合酶工作液中,蛋白酶K的濃度為10~40mg/mL,溶菌酶的濃度為10~40mg/mL。

          3.根據權利要求1所述的核酸提取試劑盒,其特征在于,所述裂解吸附液中,Gu-Hcl的濃度為3~8mol/L,Tris-Hcl的濃度為10~30mmol/L,EDTA的濃度為1~10mmol/L、異丙醇的體積比為1/2~1/6,SDS為0.1~0.5%,Triton-100為0.5~2%,β-巰基乙醇為0.5~2%,Nacl的濃度為800mmol/L,檸檬酸鈉的濃度為200mmol/L,其中檸檬酸鈉的pH=6.8。

          核酸提取試劑盒

          4.根據權利要求1所述的核酸提取試劑盒,其特征在于,所述洗滌液中,Licl的濃度為800mmol/L,Nacl的濃度為100mmol/L,MOPS的濃度為50mmol/L,乙醇的體積比為60%,其中乙醇的pH=7.0。
          5.根據權利要求1所述的核酸提取試劑盒,其特征在于,所述漂洗液中,乙醇的濃度為70%。
          6.根據權利要求1所述的核酸提取試劑盒,其特征在于,所述洗脫液中,EDTA的濃度為0.5mmol/L,Tris-Hcl的濃度10mmol/L,其中Tris-Hcl的pH=8.0。
          7.根據權利要求1~6任一所述的核酸提取試劑盒的使用方法,其特征在于,包括以下步驟:步驟一、用試管取100μL樣本,加入10μL混合酶工作液,56℃水浴5min;
          步驟二、加入750μL裂解吸附液和磁性納米微球,上下顛倒試管5~10次充分混合,在室溫下放置3min;
          步驟三、用磁分離架分離磁珠棄上清;
          步驟四、用800μL洗滌液洗2次,分離磁珠棄上清;
          步驟五、用1000μL漂洗液漂洗2次后分離磁珠棄上清;
          步驟六、室溫放置3min,揮干乙醇,加入100μL洗脫液上下吹打沉淀,使微球充分懸浮,在室溫下放置3min,得純化的DNA。
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